{[ promptMessage ]}

Bookmark it

{[ promptMessage ]}


325genChap20GeneManipReduceF07 - Chapter 20 Draft copy Gene...

Info iconThis preview shows pages 1–3. Sign up to view the full content.

View Full Document Right Arrow Icon
Chapter 20 Draft copy Gene Isolation and Manipulation p715 KNOW ALL ENZYMES and INDICATED PROTOCOLS Recombinant DNA technology Recombinant DNA = DNA produced by uniting DNA from nonhomologous sources, usually from  two different sources (life forms).   Certainly when DNA from two different species is united we produce allelic combinations that  were not found in either of the haploid gametes that united to make that individual harboring the  new construct. Notice that the primary techniques of biotechnology depend on the information we gain from other  organisms (biodiversity).  This information is coded in the organisms DNA.  Without those  systems it is doubtful if we could do genetic engineering. Cloning a particular locus There are variuos ways to approach this task.  We will focus on the following approach: We might harvest mRNA that codes for a protein of interest. Note that there will be more copies of the mRNA than there will be copies of DNA in the cell.   We can then use the  enzyme reverse transcriptase  to make a  cDNA  copy from the mRNA. Reverse transcriptase can make a ssDNA from an RNA.   This enzyme was originally discovered in the retro viruses.  (Recall HIV is a retro virus.)  These  are RNA viruses that inject RNA into the cell that they attack and then use reverse transcriptase  to make DNA which then codes for the enzymes necessary. More recently reverse transcriptase has been found in humans. (Produced by Alu elements which  are transposons found in humans.) cDNA called  complementary DNA   has had the introns removed since we harvested mature  RNA.  Note:  The regulatory elements for transcribing this locus are also missing . See p  717. How do we make as much cDNA as we would like to have?
Background image of page 1

Info iconThis preview has intentionally blurred sections. Sign up to view the full version.

View Full Document Right Arrow Icon
We must  clone  the DNA.  There are various cloning methods and each method is used in certain  circumstances. Cloning methods INTRODUCTION Using a cloning vector .  Using genetic engineering techniques we can put the DNA of interest  into the DNA of a cloning vector and then make many copies of it. Draw Fig. 20-2 p 718. Know restriction enzyme concept and use of ligase. Pp717-718. Types of cloning vectors: p721. Plasmid vectors: Plasmids often carry R factors.  This maybe why the cells do not evolve better defenses to  prevent pasmid infection.  The R factors can improve the fitness of a bacteria when it competes  with other microorganisms.
Background image of page 2
Image of page 3
This is the end of the preview. Sign up to access the rest of the document.

{[ snackBarMessage ]}