Laboratorio #7 Electroforesis.docx - Universidad de Panam Facultad de Medicina II Semestre 2017 Laboratorio N7 Electroforesis de ADN Grupo 2.1 B

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Universidad de Panamá Facultad de Medicina II Semestre 2017 Laboratorio N°7 “Electroforesis de ADN” Grupo 2.1 B Integrantes: Miryanna Miranda CIP: 8-926-338 Marcos Reina CIP: PE-15-544 Saúl Peña CIP: E- 81- 42634 Profesora: Maribel A. González T. Fecha de entrega del informe: Jueves 19 de octubre de 2017
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Introducción La electroforesis se trata de una técnica en donde se pueden separar las moléculas dependiendo de la capacidad que tengan las mismas de moverse en un campo eléctrico determinado. La separación de las moléculas estudiadas se puede llevar a cabo en la superficie hidratada de un soporte sólido, en una matriz porosa o en una disolución; es decir, en papel, en gel o electroforesis libre respectivamente. La electroforesis se usa en gran manera y casi en su mayoría en la materia del ADN recombinante puesto que ésta técnica nos permite conocer la carga que tienen los polipéptidos y además separar los diferentes compuestos del experimento realizado. Es una técnica muy utilizada también para detectar los productos que se obtienen después de varios de los procedimientos que se pueden realizar en un laboratorio y principalmente si estos experimentos son de biología molecular. Estos procedimientos incluyen la extracción de ADN, cortes con enzimas de restricción (RFLP’s) y amplificación de ADN. La electroforesis permite visualizar, en otras palabras, estos productos. La electroforesis puede ser afectada por diversos factores, por lo que se debe tener extremo cuidado durante la realización de la misma. Estos factores pueden ser diferencia de potencial, la resistencia, la intensidad, y por último las más importante, la temperatura. Se debe tener especiar cuidado en controlar el efecto Joule, para que el calor producido no desnaturalice la muestra que se está analizando. El proceso tiene elementos importantes como los amortiguadores o tampones (buffers), una fase sólida (el gel), una corriente eléctrica y un medio para visualizar las moléculas en el medio después de ésta. El amortiguador controla el pH de la solución el cual influye en la carga de las moléculas y se utiliza en el gel y el de corrida de la electroforesis. Dos tampones importantes que se usan en la electroforesis son el TAE y
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TBE, diferenciados en el ácido acético y ácido bórico respectivamente, y en las concentraciones de EDTA contenidos en los mismos. La fase sólida consiste en un gel que puede estar hecho de agarosa (separar ácidos nucleicos, ADN y ARN) o acrilamida (hecho de un polímero linear sintético que es entrecruzado con un segundo tipo de acrilamida utilizados para separar principalmente proteínas en cámaras verticales). Objetivos Objetivo General: Aprender la técnica de electroforesis y sus diversos usos en biología molecular.
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