CUANTIFICACIÓN DE AZÚCARES REDUCTORES Y CROMATOGRAFIA EN PAPEL-PRACTICA CARBOHIDRATOS.doc

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PRÁCTICA 5CUANTIFICACIÓN DE AZÚCARES REDUCTORES Y CROMATOGRAFÍA DE CARBOHIDRATOS EN PAPELINTRODUCCIÓNLa cromatografía es un método eficaz para la separación de mezclas de carbohidratos, lo cual hace factible su identificación si se aplican en la cromatografía carbohidratos conocidos, a través de la comparación de la migración y directamente por los valores de Rf.Desde 1906, el botánico Tswett logró separar los pigmentos de las hojas por percolación de su solución en éter de petróleo a través de una columna de carbonato de calcio pulverizado, donde la materia colorante aparece dividida en zonas diversamente coloreadas; sin embargo, este método no llamó particularmente la atención del mundo científico hasta su nuevo descubrimiento y perfeccionamiento por Kuhn y E. Lederer (1931). A partir de este momento no cesó de extenderse el campo de sus aplicaciones y ha sido precisamente en química biológica, vegetal y animal, donde han logrado sus éxitos más brillantes.Hay dos tipos de cromatografías, en la cromatografía de papel la celulosa de las fibras de papel está hidratada. A medida que un disolvente que contiene una mezcla de diferentes sustanciasasciende por capilaridad por el papel, mantenido en posición vertical (o desciende en la cromatografía descendente), se producen multitud de distribuciones microscópicas de las diferentes sustancias en estudio entre la fase que fluye y la fase estacionaria acuosa, ligada a las fibras de papel. Al final del proceso las diferentes sustancias han recorrido distancias diferentes desde su origen. Las moléculas analizadas se caracterizan por su Rf, que es la relación de la distancia recorrida por el soluto entre la distancia del origen al frente del solvente.El análisis de la composición de carbohidratos de una muestra se complementa siempre con la determinación de la concentración total de carbohidratos de dicha muestra. Uno de los métodos empleados para ello es el de Nelson-Somogy que consiste en hacer reaccionar un azúcar reductor

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