MATERIALES - MATERIALES Guantes Juego de pipetas...

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MATERIALES:Guantes Juego de pipetas de (100µL) y puntasCámara horizontal de electroforesis con los accesorios correspondientes (molde para hacer el gel, peine, cables para conectar a la fuente de alimentación) • Fuente de alimentación o de poderProbetaMecheroEspátulaReloj de vidrioMatraz Erlenmeyer (250 mL)Transiluminador (fuente de luz ultravioleta).Tubos tipo eppendorfReactivos:- Agarosa-Bromuro de etidio - Glicerol-Solución Buffer de carga
IntroducciónLa electroforesis en geles de agarosa o poliacrilamida es una de lasmetodologías más utilizadas en el laboratorio en todo lo relacionado con eltrabajo con ácidos nucleicos. Mediante la electroforesis podemos separarfragmentos de ADN y ARN en función de su tamaño, visualizarlos medianteuna sencilla tinción, y de esta forma determinar el contenido de ácidosnucleicos de una muestra, teniendo una estimación de su concentración ygrado de entereza. Podemos además extraer del gel los fragmentos deADN que sean de interés, para posteriormente utilizarlos en diferentesaplicaciones. La electroforesis de ADN fue, y sigue siendo, una herramientade importancia primordial en el desarrollo de las técnicas del ADNrecombinante o ingeniería genética. La idea de utilizar la técnica deelectroforesis a través de una matriz para analizar muestras de ADNcorresponde a Vin Thorne, un bioquímico del Instituto de Virología deGlasgow, quien a mediados de los años 60 del pasado siglo estabainteresado en caracterizar las distintas formas de ADN que se obtenían departículas purificadas de polyomavirus. Su razonamiento era que unacombinación de fuerzas eléctricas y de fricción permitiría el desplazamientoy separación en función del tamaño o topología de diferentes moléculas deADN. Éste es exactamente el principio en que se basa la electroforesis deácidos nucleicos. Sometidos a un campo eléctrico, la carga neta negativadel ADN y el ARN hará que estos se muevan en dirección al ánodo Si se

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