Laboratorio de bioqu\u00edmica II.docx - Laboratorio de bioqu\u00edmica II Extracci\u00f3n de ADN y electroforesis Jose Luis Henao Carolina Jaramillo V\u00e1squez

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Laboratorio de bioquímica II Extracción de ADN y electroforesis Jose Luis Henao Carolina Jaramillo Vásquez Sebastián Palacio Betancur Docente: Diego Fernando Uribe Instituto Tecnológico Metropolitano 06 de noviembre de 2015 Medellín
4.3 Realice un esquema paso por paso que muestre cómo interactúa el ADN con cada solución utilizada en el procedimiento. Solución de lavado (N°1) Solución de tampón de lisis (N°2)
Solución de Isopropanopol Solución de Etanol
Solución de Reconstrucción 4.6 ¿ Cómo se puede asegurar que el producto final de la extracción es Ácido Desoxirribonucleico (ADN) y no Ácido Ribonucleico (ARN) ? Cuando de adiciona el Etanol y el tampón de lisis las RNAsas son activadas para degradar el ARN a la solución restante de la extracción del ADN, el ARN es eliminado como impureza al igual que las proteínas, en este caso se asegura que el producto final de la extracción es ADN y no ARN. 4.7 ¿ Cuál es el componente del ADN que absorbe a la longitud de 260 nm y para qué puede servir esta característica en la cuantificación del ADN ? El ADN presenta un máximo de absorbencia en los ácidos nucleicos de 260nm, y sirve para comprobar que el ADN extraído está suficientemente puro y tiene pocas proteínas contaminantes; esto se determina mediante de una espectrofotometría.
La magnitud de absorción de estos ácidos constituye una medida de su integridad ya que los ácidos nucleicos parcialmente degradados absorben más fuertemente que los materiales nativos. Las bases que componen los ácidos poseen un aspecto de absorción suficientemente diferente; lo cual permite usarlo en su identificación. (Las bases puricas y pirimidicas del ADN tiene propiedades de absorber luz ultravioleta a esa longitud de onda) 4.9 ¿ Qué se puede decir si una extracto de ADN presenta un radio de absorbencia 260/280:>1.8 ?

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