metodos cromatogr\u00e1ficos - M\u00e9todos cromatogr\u00e1ficos QA Alejandro Hern\u00e1ndez Loyola Cromatograf\u00eda T\u00e9cnica de separaci\u00f3n por las propiedades

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Métodos cromatográficos. QA Alejandro Hernández Loyola
Cromatografía Técnica de separación por las propiedades fisicoquímicas de las biomoléculas. Dependiendo del tipo de cromatografía va a variar el grado de purificación que se puede alcanzar.
Utilidad de la cromatografía. En la purificación de proteínas, la cromatografía nos permitirá eliminar muchos contaminantes propios de la muestra. Para llevar a cabo la separación se aprovechan las propiedades fisicoquímicas de las proteínas: Propiedad Tipo de cromatografía Tamaño Exclusión molecular o filtración en gel Carga Intercambio iónico Bioreconocimiento (unión específica a ligandos) Afinidad
Partes de la columna de cromatografía.
Procedimiento básico de una cromatografía 1.Equilibrio de la columna. Se hace pasar el buffer necesario para la adsorción de la proteína a la resina. 2. Aplicación de la muestra. Se aplica la muestra en la columna, promoviendo la unión de la proteína con la resina. 3. Lavados. Se hace pasar un gran volumen de buffer para eliminar las proteínas que no se unieron a la columna, así como las posibles uniones no específicas.

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