Extraktion av fria och esterifierade desmetylsteroler

Extraktion av fria och esterifierade desmetylsteroler -...

Info icon This preview shows page 1. Sign up to view the full content.

View Full Document Right Arrow Icon
Extraktion av fria och esterifierade desmetylsteroler (kolesterol, campesterol, isofucosterol, sitosterol, stigmasterol) från Arabidopsisblad 1. Hacka sönder bladprov i flytande kväve, med en glasstav i glasrör (ca 200 hack). (Lite knepigt att få ner bladen i glasrör, de får ej tina innan steg 2.) 2. Extrahera lipider från bladprov, med kloroform:metanol (2:1)-lösning. 2ml/prov. 1 timme i rumstemperatur. 3. Tillsätt 200µl vatten så att gränsen mellan vattenfas (övre fasen) och kloroform:metanolfas (undre) blir tydlig. 4. Ta tillvara kloroform:metanolfas, d v s för över hela den volymen med Pasteur- pipett till nytt glasrör. 5. Indunsta (torka) med kvävgas. 6. Separera steroler från övriga lipider genom att förtvåla de senare, d v s tillsätt till lipidproverna 500µl 1 M KOH i metanol, ställ i vattenbad 70ºC 1 timme. (KOH- lösning görs iordning samma dag, en stund innan så KOH-pellets hinner lösas upp i metanol) Det här steget gör att vi, i vår extraktion, får med både de steroler som är fria i växten och de steroler som förekommer som sterylestrar.
Image of page 1
This is the end of the preview. Sign up to access the rest of the document.

{[ snackBarMessage ]}

What students are saying

  • Left Quote Icon

    As a current student on this bumpy collegiate pathway, I stumbled upon Course Hero, where I can find study resources for nearly all my courses, get online help from tutors 24/7, and even share my old projects, papers, and lecture notes with other students.

    Student Picture

    Kiran Temple University Fox School of Business ‘17, Course Hero Intern

  • Left Quote Icon

    I cannot even describe how much Course Hero helped me this summer. It’s truly become something I can always rely on and help me. In the end, I was not only able to survive summer classes, but I was able to thrive thanks to Course Hero.

    Student Picture

    Dana University of Pennsylvania ‘17, Course Hero Intern

  • Left Quote Icon

    The ability to access any university’s resources through Course Hero proved invaluable in my case. I was behind on Tulane coursework and actually used UCLA’s materials to help me move forward and get everything together on time.

    Student Picture

    Jill Tulane University ‘16, Course Hero Intern