REPORTE PRACT 4.docx - Universidad del Valle de M\u00e9xico Pr\u00e1ctica numero 5 Cuantificaci\u00f3n de muestras de DNA y determinaci\u00f3n de integridad por

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Universidad del Valle de MéxicoPráctica numero 5: Cuantificación de muestras de DNA y determinación deintegridad por electroforesis. Ruiz Lopez Laura Berenice Ble Magaña Luis Esteban Asignatura: Biología MolecularLicenciatura QFBT Periodo 2018-2Fecha de entrega: 02 de octubre de 2018Docente: Fernando Rojas Rojas RESUMEN: Obtener una cantidad significativa de DNA y de una calidad adecuada es de sumaimportancia siendo el primer paso para múltiples aplicaciones o técnicas como PCR, entre otras. Enésta práctica se adecuó un protocolo para primeramente constatar la existencia de DNA genómico pormedio de una electroforesis en gel de agarosa (prueba cualitativa) y en segundo, cuantificar la cantidadde ácidos nucleicos y otros componentes celulares por espectrofotometría UV/Visible (pruebacuantitativa). Se obtuvo como resultado que el DNA está dentro de los rangos de pureza, sin embargohay una ligera cantidad de contaminantes. Palabras Clave: Fuerzas eléctricas, NanoDrop, longitud de onda. IntroducciónLa electroforesis en geles de agarosa opoliacrilamida es una de las metodologías másutilizadas en el laboratorio en todo lo relacionadocon el trabajo con ácidos nucleicos. Mediante la electroforesis podemos separarfragmentos de ADN y ARN en función de sutamaño, visualizarlos mediante una sencillatinción, y de esta forma determinar el contenidode ácidos nucleicos de una muestra, teniendo unaestimación de su concentración y grado deentereza.El fundamento de la electroforesis de ácidosnucleicos se basa en que la atracción de fuerzaseléctricas y de fricción permite el desplazamientoy separación en función del tamaño de diferentesmoléculas de ADN. Es decir, sometidos a uncampo eléctrico, la carga neta negativa del ADN yel ARN hará que estos se muevan en dirección alánodo, haciendo que la molécula de mayortamaño (ADN) migre con más lentitud, mientrasque la de menor tamaño (ARN) avanza más en elgel (Thorne Vin, 1968).

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