Tema 10- T\u00e9cnicas inmunol\u00f3gicas..docx - Tema 10 \u201cT\u00e9cnicas inmunol\u00f3gicas.\u201d 10.1 Introducci\u00f3n y conceptos generales Las t\u00e9cnicas inmunol\u00f3gicas

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los derechos. No se permite la explotación económica ni la transformación de esta obra. Queda permitda la impresión en su totalidad. Tema 10: “Técnicas inmunológicas.” 10.1 Introducción y conceptos generales. Las técnicas inmunológicas se basarán en la especificidad de unión entre antígenos y antcuerpos. Nos permitrán estudiar cantdades pequeñas de moléculas no necesariamente radiactvas presentes en mezclas complejas. Los antcuerpos se definirán como proteínas séricas denominadas inmunoglobulinas (Ig) que serán sintetzadas como respuesta a la presencia de un antígeno en el organismo, siendo capaz de unirse de forma específica a él, marcándolo. Estará formado por dos cadenas pesadas de aproximadamente 50 kDa y dos cadenas ligeras de 25 kDa dispuestas en forma de “Y”; existrán en forma de monómeros, dímeros o pentámeros. Aunque encontraremos diversos tpos de inmunoglobulinas (IgG, IgM, IgA, IgD e IgE), centraremos nuestro interés en las inmunoglobulinas G. Las inmunoglobulinas G serán las más abundantes de todas ellas; además, serán fácilmente proteolizables por acción de proteasas debido a la abundante cantdad de prolina que presentarán. Al separarse, lo harán en dos fragmentos: (1) un fragmento de unión al antígeno o Fab y (2) un fragmento cristalizable o Fc, lugar al que se unirán de forma covalente enzimas o fluorocromos, entre otros marcadores. Por otra parte, los antígenos serán aquellas sustancias extrañas que promuevan una respuesta inmune al ser introducidas dentro de un organismo susceptble, siendo capaces de unirse con los antcuerpos específicos que haya formado el organismo. Normalmente, serán de alto peso molecular. Se utlizarán haptenos (sustancias de pequeño peso molecular que no inducirán respuesta inmune) acoplados a grandes proteínas para generar respuestas inmunes. En cuanto a la morfología de antcuerpos y antígenos, destacaremos las siguientes regiones: (1) paratopo , o regiones variables del antcuerpo que contactarán con el antígeno, y (2) epítopes , regiones de los antígenos que podrán unirse específicamente a un antcuerpo. Por lo general, secuencias de ocho o nueve aminoácidos serán suficientes para formar el epítope al que se unirán los antcuerpos; estos aminoácidos podrán estar dispuestos de forma contnua (lineales) o bien estar juntos simplemente por la conformación tridimensional de la molécula (epítopes conformacionales). Por este motvo, será de gran importancia saber si la molécula a estudiar estará desnaturalizada o en su conformación natva. Interacción antígeno-anticuerpo : existrá complementariedad espacial entre ambos elementos mediante uniones no covalentes (puentes de hidrógeno, interacciones hidrofóbicas, fuerzas electrostátcas, de van der Waals…); los antígenos podrán ser multvalentes siempre y cuando posean más de un epítope. La unión entre ambos será específica, reversible, dependerá del pH y será sensible a la temperatura y a la fuerza iónica. A contnuación, definiremos conceptos relacionados con esta interacción: Afinidad : describirá la fuerza de interacción entre un antcuerpo y un antígeno en un único sito antgénico.
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  • Winter '20
  • Raul
  • Proteína, Enzima, Anticuerpo, Linfocito, Antígeno, Epítopo

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