El iniciador es el ion persulfato s2o8 que se aade en

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Unformatted text preview: coeficiente de fricción Poliacrilamida • Los geles de poliacrilamida se forman Los por la polimerización de la acrilamida por acción de un agente formador de enlaces cruzados (“cross-linking”), la bis-acrilamida. bis-acrilamida. Reacción de polimerización Reacción • La reacción se desencadena por la presencia de un La iniciador y se continua con ayuda de un catalizador. – El iniciador es el ion persulfato (S2O8-) que se añade en que forma de persulfato amónico (APS). – Como catalizador se suele utilizar TEMED (N,N,N,N'tetrametilendiamina). – En algunas situaciones, como por ejemplo en el En isoelectroenfoque en el que la presencia de persulfato puede interferir con la electroforesis se emplean otros sistemas catalizador-iniciador. sistemas Oxígeno y polimerización Oxígeno • El oxígeno es un inhibidor de la polimerización de El la acrilamida, por lo que la • Las soluciones de acrilamida se desgasifican para Las que la polimerización sea completa y a con buena velocidad. velocidad. • Además, durante la polimerización se libera calor Además, (reacción exotérmica), lo que podría provocar la formación de burbujas en el seno del gel. formación • La velocidad de polimerización es La proporcional a la concentración de persulfato (iniciador) y TEMED (catalizador) adicionados. (catalizador) • La porosidad del gel la determina las proporciones La relativas de poliacrilamida y bis-acrilamida relativas • Es menor el poro cuanta más bisacrilamida vs. acrilamida Es se use. • El porcentaje total de acrilamida/bisacrilamida determina El el rango de separación del gel. • Los geles se denominan en función del % de Los acrilamida/bisacrilamida que contienen. • La mayoría de las proteínas se separan bien en el rango 5 a La 15%. Un menor porcentaje (mayor tamaño de poro) es mejor para separar proteínas de gran tamaño. mejor Radicales libres en la polimerización de la acrilamida polimerización S2O8= SO4 . Sulfato radical libre = O SO4 . + CH2= CH C NH2 Acrilamida O = Persulfato CH2 CH C . NH2 Acrilamida radical libre Enlace acrilamida - bisacrilamida Enlace O CH2 C C CH2 CH CH 2 O CH2 CH2 CO C C CH2 CH2 C CH2 CH2 CH2 O Estructura de la poliacrilamida Estructura Ventajas de los geles de poliacrilamida poliacrilamida...
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