Glicinato como slo hay una pequea concentracin de

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Unformatted text preview: Cl- del amotiguador de muestra en el gel de los compactación (“stacking”). PAGE -SDS PAGE • Cuando se someten las proteínas a el campo Cuando eléctrico todas las especies deben migrar a la misma velocidad para mantener el circuito eléctrico. • Los iones glicinato sólo se pueden desplazar a la Los misma velocidad que los iones Cl- si hay una misma región de con un gradiente de alto voltaje. • El gradiente es inversamente proporcional a la El conductividad que es a su vez proporcional a la concentración. PAGE -SDS PAGE • El resultado es que las tres especies de interés ajustan sus El concentraciones de forma que [Cl-] > [proteína-SDS] > concentraciones [proteína-SDS] [glicinato-]. [glicinato ]. • Como sólo hay una pequeña concentración de proteínaSDS este complejo se concentra en una banda muy SDS delgada entre las fronteras de migración del Cl- y del delgada glicinato-. glicinato • Cuando el glicinato- alcanza el borde del gel de separación adquiere una carga mayor en el nuevo medio, debido al pH superior, e incrementa su movilidad. • A partir de ese momento la interfase entre el glicinato - y el SDS SDS • Otros nombres, Dodecilsulfato de sodio, laurilsulfato de sodio. • Detergente aniónico Detergente • Desnaturalizante • Se une a las cadenas polipeptídicas con una Se relación de 1.4 g de SDS por g de proteína, aproximadamente una molécula de SDS por cada dos aminoácidos de la cadena. dos SDS SDS • La unión masiva de moléculas de SDS bloquea la La carga propia de la molécula de proteína • Le confiere al complejo una carga neta negativa Le proporcional a su masa. • Todas las proteínas acomplejadas con SDS viajan Todas hacia el ánodo. SDS SDS • La separación de los complejos SDS-proteína es – proporcional sólo a la masa de la proteína pues todas proporcional tienen la misma carga por unidad de masa. • Se puede determinar el peso molecular aparente de Se cualquier proteína por comparación con un patrón de proteínas de pesos moleculares conocidos. de •...
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This document was uploaded on 12/14/2013.

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