Sonicaci\u00f3n Consiste en la aplicaci\u00f3n de ultrasonidos a una suspensi\u00f3n celular

Sonicación consiste en la aplicación de

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SonicaciónConsiste en la aplicación de ultrasonidos a una suspensión celular. Esto produce una intensa agitación lo que destruye las membranas celularesPrensa francesaRompimiento de las células en una combinación de presión y filtración.Mecanismo enestado sólidoMoliendaLas células son rotas por medio de una molienda con abrasivos, ejemplo: arena.Molinos de bolasLas células son trituradas con esferas de vidrio o acero.NomecánicosFísicosShock osmóticoRuptura osmótica de la membranaTemperaturas extremas (congelación, descongelación)Formación y fusión de cristales de hielo. Rompimiento con Nitrógeno líquido de tejidos vegetales.4
Métodos de extracción, purificación e inmovilización enzimáticaDescompresión de gasRuptura esplénica de las células por la generación de burbujas al disminuir la presión (ley de Henry)Cavitación hidrodinámicaconsiste en la formación de microburbujas de vapor producidas de forma mecánica en un medio líquido por variaciones en la presión, lo cual induce al rompimiento de la pared celular.DesecaciónSecado por aire forzado.Deshidratación celular, provocando un rompimiento de las mismas.Secado al vacíoSecado por solventesQuímicospH extremosTransiciones en la escala de pH, básico y ácido. Algunas células no son resistentes a estas variaciones.DetergentesPermeabilización de células por solubilización de proteínas de membrana, debido a apertura de poros. Ejemplo: Triton X-100, SDS, Tween, Spam.Solventes orgánicosDisuelven la pared celular fundamentalmente por la disolución de lípidos asociados a membranas. Ejemplo: Tolueno, acetona.AntibióticosAlgunos se utilizan por sus propiedades en la síntesis de la pared celular, como algunas penicilinas.Agentes quelantesAlgunos como el EDTA atrapan cationes divalentes (Ca+2) que dibilita la membrana celular.Agentes Urea o sales de guanidina favorecen la disolución de 5
Métodos de extracción, purificación e inmovilización enzimáticacaotrópicosproteínas y minerales de la pared celular de algunas bacterias ocasionando su ruptura. Otro agente caotrópico utilizado es el isotiocianato de guanidinioBiológicosAdición de enzimasLisozima + EDTA; esta combinación digiere las paredes celulares por ruptura de los enlances β(1→4) glicosídicos entre el ácido N-acetilmurímico (NAM) y la N-acetilglucosamina (NAG) del mucopéptido. Otro ejemplo es: la proteinasa K junto con SDS.AutolisisEs un proceso biológico por el cual una célula se autodestruye, en vegetales la absorción de agua en exceso puede causar el rompimiento de vacuolas; en animales la producción de la enzima autolisasa puede ocasionar la hidrólisis celular; en bacterias las enzimas autolíticas de la pared bacteriana (autolisinas) lleva a la lisis celular.

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