Analizar proteínas usando n x 625 como factor de

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Analizar proteínas usando N x 6,25 como factor de conversión en el residuo de unade las muestras de los duplicados.Calcinar el residuo de la segunda muestra del duplicado durante 5 horas a 525 ºC.Enfriar en desecador y pesar.Restar el peso del crisol y de la celita para determinar cenizas. Efectuar la determina-ción del blanco en duplicado y en las mismas condiciones descritas en el procedimientopara el análisis de muestras.Corregir el residuo restándole las cenizas, proteína y blanco correspondiente.11.2.2.Almidón11.2.2.1.Extracción selectiva de almidón11.2.2.1.1.Con cloruro de calcio(recomendado para el análisispolarométrico del almidón)Colocar 2-50g de muestra en un matraz Erlenmeyer y formar una pasta con 10 mL deagua.Adicionar 50 mL de solución de cloruro de calcio ácida (620 g CaCl26H2O en180 mL de agua, con 18 g de acetato de sodio trihidratado en 20 mL de agua, ajustarel pH a 2-3 con ácido acético) y calentar en autoclave a 120 °C por 10 min.Enfriar la mezcla en un baño de agua fría y transferir a un matraz aforado de 100 mL,utilizando solución de cloruro de calcio hasta un volumen cercano a 90 mL. Adicionar2 mL de reactivo de Carrez I y mezclar bien, adicionar 2 mL de solución de Carrez II,agitar nuevamente y llevar a la marca con solución de cloruro de calcio.
95Fundamentosy TécnicasFiltrar a través de papel Whatman No. 541, el filtrado debe ser claro. En esta soluciónse encuentra el almidón disuelto.11.2.2.1.2.Con ácido perclórico (recomendado parala formación de un complejo insoluble con yodo)Colocar 50-250 mg de muestra seca en un tubo de ensaye con un poco de arenay adicionar 4 mL de agua. Calentar en un baño de agua hirviendo el tubo por 15min., hasta gelatinizar el almidón. Enfriar el tubo a temperatura ambiente y adicionarrápidamentecon agitación 3 mL de solución de ácido perclórico al 72%.Dispersar la muestra con una varilla de vidrio durante un minuto, repetir la operaciónvarias veces durante 15-20 min. Enjuagar con 20 mL de agua la varilla, recuperandoen el tubo, centrifugar y decantar el sobrenadante.Realizar una vez más la extracción en el residuo, con 4 mL de agua y 3 mL de ácidoperclórico.Combinar los sobrenadantes y llevarlos a un volumen de 50 mL con agua. Se re-comienda analizar inmediatamente.11.2.2.1.3 .Con etanol y ácido perclórico (recomendado pararealizar una reacción con antrona o fenol-sulfúrico)Pesar aproximadamente 0.2 g de muestra sólida finamente molida y colocar en un tubode centrífuga de 50 mL, adicionar dos gotas de etanol al 80% (v/v) para humedecerla muestra. Adicionar 5 mL de agua y agitar.Adicionar 25 mL de etanol al 80% caliente, agitar y dejar reposar 5 min. Centrifugar,decantar el sobrenadante y repetir la extracción con 30 mL de etanol al 80%. Ensolución se encuentran los azúcares y para su análisis es necesario eliminar el alcoholpor evaporación a presión reducida.Adicionar 5 mL de agua a la porción insoluble, posteriormente65 mL de solución deácido perclórico al 52% (v/v), agitar la mezcla. Continuar la agitación por 15 min,después adicionar 20 mL de agua, centrifugar. Decantar el sobrenadante en un matraz

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Term
Spring
Professor
N/A
Tags
pH, The American, Aceite, Sodio, Punto de ebullici n

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