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La cromatografía de gases como requiere que la

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La cromatografía de gases, como requiere que la sustancia problema sea volatilizable, presenta poca utilidad en los análisis inorgánicos; su mayor aplicación en este campo es la determina- ción de compuestos organometálicos, como el metilmercurio. Por el contrario, la cromatografía de líquidos posee muchas aplicaciones para el análisis de metales y, especialmente, para la determinación de aniones. Últimamente se está proponiendo la determi- nación de cationes y aniones inorganicos por electroforesis capilar aunque por el momento no parece que vaya a desplazar a las técnicas ante- riormente citadas. SISTEMÁTICAS PARA TÓXICOS ORGÁNICOS Este tipo de sistemática pretende la separación de casi todos los tóxicos de naturaleza orgánica, e incluye los que clásicamente se denominaban «orgánicos fijos» (no volatilizables), junto con los 528 TOXICOLOGÍA FUNDAMENTAL
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que, además de poderse separar en forma de vapor, también pueden ser extraídos por disolventes orgá- nicos. Es un método clásico, aún interesante por su extensa aplicabilidad y su capacidad didáctica. Fase A. Extracción: con disolvente apolar; con etanol. Fase B. Purificación del extracto. Fase C. Fracionamiento del extracto, para grupos: ácidos, — básicos, — neutros. Fase D. Ensayos previos. Detección. Fase E. Identificación: Técnicas instrumentales. Confirmación identidad. Cuantificación. Hidrólisis y digestiones En las muestras biológicas los xenobióticos y sus metabolitos pueden encontrarse unidos a las grasas y proteínas celulares, o en forma de trans- porte unidos a las proteínas plasmáticas, o bien disueltos en el plasma y líquidos intra y extracelu- lares, tanto en forma libre como en forma de con- jugados. (Véase Cap. 4). Ocasionalmente puede interesar determinar ais- ladamente el compuesto en forma libre, que se puede separar mediante membranas semipermea- bles (diálisis o ultrafiltración), pero normalmente se valora la totalidad del xenobiótico presente en la muestra. Para ello es necesario romper las uniones proteicas y desproteinizar e hidrolizar los ésteres conjugados. Cuando se trabaja con plasma u orina, antes de efectuar las extracciones se puede realizar la hidró- lisis de los conjugados por vía química (ácida o alcalina) o enzimática, que aumentan el rendi- miento de la extracción de tóxicos como los opiá- ceos, fenotiazinas, cannabinóides, etc. La hidróli- sis química puede afectar los xenobióticos lábiles a las condiciones de la reacción (atropina, cocaína, benzodiazepínicos, etc.), lo que no ocurre en la hidrólisis enzimática. Para realizar ésta se pone la muestra a pH 5,3 con ClH 0,2 N, se le añade un volumen 100 veces menor de una solución acuosa de mezcla de glucuronidasa (12 unidades/ml) y arilsufaltasa (60 u/ml) y se incuba a 36 o C durante 12-24 horas; la aplicación de cada una de las enzi- mas puede hacerse en dos operaciones sucesivas.
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