Toxicologia_Fundamental_Repetto_4ª_Edicion_booksmedicos.org.pdf

A sulfato amónico disminuye el rendimiento para

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a) Sulfato amónico . Disminuye el rendimiento para tóxicos ácidos y neutros. b) Tungstato sódico. Disminuye el rendimiento de bases. c) Ácido tricloroacético, al 10 por 100. d) Cloruro de aluminio. Da bajos rendimientos con ácidos. 2. Coagulación de las albúminas con etanol o acetona. El etanol absoluto es el más comúnmente usado desde que fue propuesto por Stas. La mejor técnica consiste en concentrar el extracto hasta líquido den- so mediante evaporación a presión reducida, para calentar lo menos posible y preferiblemente en eva- porador rotativo. Al sirupo resultante, una vez frío, se le añade etanol en pequeñas porciones para que la coagulación no sea en bloque. Después de refri- gerar, se filtra, y el líquido se vuelve a concentrar y se añade alcohol, operación que se repite varias veces. Finalmente, tras la última concentración, se disuelve el residuo con agua destilada y unas gotas de ácido sulfúrico. Con este proceso se logra elimi- nar la mayor proporción de las proteínas, así como las grasas, que no se disolverán en el agua. 3. Técnicas cromatográficas. Todas las varian- tes de la cromatografía pueden emplearse, según cada caso, para la purificación del extracto, espe- cialmente cuando lo tenemos en disolvente no acuoso. a) Cromatografía de columna de florisil (silica- to magnésico activado), silicagel, alúmina (óxido alumínico). b) Cromatografía sobre papel o sobre capa de silicagel. c) Cromatografía gaseosa preparativa. 4. Técnicas basadas en el reparto diferencial en mezclas de disolventes, como agua-hexano, agua- acetonitrilo-hexano, etc. 5. Digestión enzimática proteolítica. (Véase lo expuesto anteriormente en el apartado Hidrólisis y digestiones.) Fase C. Fraccionamiento del extracto El extracto purificado obtenido en la fase B, o bien directamente las muestras líquidas (suero, ori- na, etc.), se someten a un proceso que separe dis- tintos grupos químicos. Este fraccionamiento per- sigue un doble objetivo; por un lado puede separar tóxicos que estuvieran conjuntamente presentes, y por otra parte, si posteriormente detectamos la pre- sencia de una sustancia en una de las fracciones, las características grupales de ésta serán ya el pri- mer dato de que dispondremos para la identifica- ción del tóxico. Se han propuesto diversos procedimientos, pero el que, con carácter general, sigue teniendo mayor aceptación es el de Stas, modificado por Otto y Ogier, y numerosos toxicólogos: se obtienen tres fracciones, una con los productos de carácter ácido, otra con las sustancias básicas y una tercera con los productos neutros. Debe tenerse presente que esta división no es taxativa, y que hay productos, como la cafeína y otras xantinas, que poseen un carácter anfótero y pueden aparecer en cualquiera de las dos primeras fracciones; metabolitos de algunas sustan- cias básicas se separan también en la fracción ácida como ocurre con los sulfóxidos de las fenotiazinas, los derivados fenólicos de la fenacetina, metaboli- tos de los benzodiazepínicos, etc.
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